使用組織切片機切片不易，但該避的坑你不能不懂！

　　病理實(shí)驗看似簡(jiǎn)單，實(shí)際上稍不注意細節，使用組織切片機就會(huì )漏洞百出，不同組織如何保存？不同切片有何區別？刀法需要慢慢練，但該避的坑你不能不懂！

　　

　　今天遠湘生物匯總了那些關(guān)于組織切片機進(jìn)行病理切片的問(wèn)題，看小編如何搞定這些實(shí)驗難題。

　　

　　一、組織如何保存？

　　

　　普通病理用固定液（多聚甲醛）保存；免疫組化、免疫熒光實(shí)驗不宜固定時(shí)間太久。

　　

　　二、不同組織都用一個(gè)脫水流程嗎？

　　

　　不同組織，其結構不同，脫水流程也有是區別的

　　

　　三、石蠟包埋切片一般切的厚度是多少？冰凍切片切多厚？

　　

　　冰凍切片厚度為6-10um；石蠟切片為4-6um。

　　

　　四、冰切出現裂痕的原因？

　　

　　可能是防卷板沒(méi)放好，冷凍切片機的溫度一般是零下10到15℃；還有可能是你的組織比較硬或者是刀片的問(wèn)題，不同組織切片機里也要不同溫度需要注意一下。

　　

　　五、為什么切片總是脫片？

　　

　　1、粘附劑因素在制作組織學(xué)和病理學(xué)石蠟切片時(shí)，一般用甘油蛋白做粘附劑，但若甘油蛋白配制的時(shí)間過(guò)長(cháng)，蛋白質(zhì)變性，甘油蛋白的粘附作用即降低，可導致組織切片與載玻片粘附不牢，切片一進(jìn)入二甲苯溶液即從玻片上脫落下來(lái)。

　　

　　2、溫度的影響常規石蠟切片染色，溫度一般在20-37較好。組織從二甲苯脫蠟出來(lái)，立即進(jìn)入室溫的純酒精清洗，這樣組織一下從37降至4℃左右，一冷一熱，熱脹冷縮，造成組織容易從載玻片上脫落下來(lái)。

　　

　　3、浸蠟時(shí)間的影響，組織取材后在脫水，浸蠟時(shí)間和包埋溫度上掌握不夠準確，特別是腺體組織比較嬌嫩，稍有過(guò)頭組織就變脆，在染色過(guò)程中就很容易出現脫片現象。